概要

リコンビナントタンパク質の産生は、必ずしも容易ではありません。多くの要因がタンパク質発現と精製に影響する可能性があるため、その最適化プロセスには常に労力と時間がかかります。いくつかの不確実性と課題に対処するため、GenScriptのタンパク質発現の専門家は、最先端のソリューションによる微生物発現カスタムサービスを提供しています。コドン最適化からスモールスケールの発現評価試験およびスケールアップのための遺伝子合成、そしてタンパク質の精製とキャラクタライゼーションも含めて、お客様はご要件に沿ってフレキシブルにオプションをお選び頂けます。さらに、ラージスケールでの製造には、生物学的機能を持つタンパク質を封入体から回収する、当社開発の特殊なタンパク質リフォールディング技術もご利用頂けます。ハイスループットな大腸菌発現プラットフォームでは、お客様のターゲットスクリーニングプロジェクトの迅速化を支援するため、スモールスケール発現向けに費用対効果の良いオプションを提供しています。

よく用いられている発現系である大腸菌は、遺伝子操作が簡単です。そして幅広いリコンビナントタンパク質、例えばサイトカイン、酵素、抗原や抗体フラグメント等の、低費用で高収量な生産を支えています。当社のカスタマイズしたワークフローは、お客様のダウンストリームアプリケーションに対応可能です。GenScriptは、大腸菌発現系を使用し、50,000バッチ以上のリコンビナントタンパク質のお届けに成功しています。

ハイライト

製造に最適化された酵素
製造に最適化された酵素
高収量のタンパク質 >15g/L
高収量のタンパク質 >15g/L
最大キログラムレベルまでのフレキシブルなスケールアップ
最大キログラムレベルまでのフレキシブルなスケールアップ

標準的なワークフロー

標準的なワークフロー

サービスの詳細

マイルストーン 仕様 納品物 タイムライン*
1 遺伝子合成、クローニング、プラスミド調製
  • 遺伝子合成およびコドン最適化
  • 適切な発現ベクターへのサブクローニング
  • プラスミド調製およびDNAの品質管理
  • タンパク質
  • 品質管理 (QC) データ
≤2 週間
2 タンパク質発現評価
  • プラスミド導入による適切な微生物発現株の形質転換
  • タンパク質発現評価および最適化
≤1 週間
3 タンパク質精製、タグ除去(オプション)およびリフォールディング(オプション)
  • 最適化条件を使用したスケールアップタンパク質発現
  • ご要望のタンパク質量と純度に調整するための精製
  • タグ除去およびタグフリータンパク質の分離(ご要望に応じて)
  • 不溶性タンパク質の場合のリフォールディング(必要時のみ実施)
≤1 週間
4 品質管理 (QC) と納品
  • 純度分析およびSDS-PAGEとウェスタンブロット(タグ付きタンパク質用)を使用した検出
  • ブラッドフォードアッセイによる定量
  • タンパク質の納品
≤1 週間

注:
*タイムラインは全て概算です。多くの場合、4~6週間でのお届けとなります。ただし、オプションによって全体のタイムラインが若干伸びる場合があります。(国際輸送期間によっても変動がございます)
ラージスケールでのタンパク質産生のご希望は、完全カスタマイズ可能な当社の大腸菌発酵槽大量生産サービスをお試しください。詳細は当社の技術担当マネージャーへご相談下さい。

サービスの特徴‐可溶性タンパク質の戦略

解決策 1
複数のタグでのスクリーニング
解決策 2
標準の変性
解決策 3
プロフェッショナル封入体リフォールディングサービス
  • 目的:活性のあるタンパク質を入手したいが、上清や他の細胞ではうまく行かない。
  • 特徴:リフォールディング条件、封入体(IB)処理、精製と分析法に尽力し、活性を持った天然なリフォールディングに、より近づけることができます。
  • アプリケーション:ラージスケールの発現とリフォールディング用
解決策 1: 複数のタグでのスクリーニング
  • 目的: タンパク質の可溶状態を維持
  • 特徴: 洗剤バッファーで再溶解し、透析を行うことができる。
  • アプリケーション: 抗原(一般的にウェスタンブロット用の抗体を作製する)
  • ワークフロー :発現評価 > スケールアップ発現 > IBs洗浄 > IBs可溶化 > 精製 > 透析およびQC
A World Of Possibilities, Reimagined
  • 目的:活性のあるタンパク質を入手したいが、上清や他の細胞ではうまく行かない。
  • 特徴:リフォールディング条件、封入体(IB)処理、精製と分析法に尽力し、活性を持った天然なリフォールディングに、より近づけることができます。
  • アプリケーション:ラージスケールの発現とリフォールディング用
  • 技術的努力:
    • 希釈リフォールディング法による、17種類のリフォールディングバッファースクリーニング
    • 還元および非還元SDS-PAGE、SEC-HPLCおよびLC-MSによるリフォールディング結果の確認

事例集

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